徠卡熒光顯微鏡的性能特點(diǎn)及熒光顯微術(shù)的特點(diǎn)

徠卡顯微鏡是任何顯微術(shù)的基本工具，它的主要作用是使被檢標(biāo)本圖象得到不同程度的放大。在徠卡熒光顯微術(shù)中，徠卡熒光光源裝置是提供一定波長(zhǎng)的激發(fā)光使被檢標(biāo)本受激發(fā)射熒光，再通過(guò)徠卡顯微鏡的物鏡，目鏡系統(tǒng)使熒光圖象放大以供觀察，因此，一般來(lái)說(shuō)，任何顯微鏡都可以用于熒光顯微術(shù)。不過(guò)，由于徠卡熒光顯微鏡所放大的象是熒光圖象，必須根據(jù)熒光產(chǎn)生和表現(xiàn)的特點(diǎn)，因此在使用方法上略有講究。

熒光顯微術(shù)是普通顯微術(shù)的重大發(fā)展。它具有*的*性。熒光顯微術(shù)是在黑暗的背景下觀察標(biāo)本的彩色圖像，有良好的反襯，故觀察清楚、方便，易于鑒別，眼睛也不易疲勞。由于熒光染色素的濃度極?。▋x1：100000）便能發(fā)出明亮的熒光，因此一般油機(jī)體眾說(shuō)是無(wú)毒的，為活體觀察，如研究功能器官的過(guò)程和細(xì)微結(jié)構(gòu)，某些代謝過(guò)程的變化等，提供了廣泛的可能性。另外，熒光色素染色法比較簡(jiǎn)單，時(shí)間短，標(biāo)本制作容易，特別適于快速工作，如傳染病的快速診斷等。

（1）熒光顯微術(shù)方法的選擇徠卡熒光顯微鏡可用明場(chǎng)或暗場(chǎng)方法，—般用暗場(chǎng)效果較好，因?yàn)樗a(chǎn)生的現(xiàn)場(chǎng)背景是黑的，圖象反襯強(qiáng)，不過(guò)沒有明場(chǎng)方便。至于透射熒光還是反射熒光，一般來(lái)說(shuō)，反射熒光應(yīng)用范圍廣一些，它不僅適用觀察普通標(biāo)本片，而且還能現(xiàn)察不適明標(biāo)本。

（2）結(jié)果記錄方法徠卡熒光顯微術(shù)所觀察的熒光圖象，主要以兩個(gè)指標(biāo)判斷結(jié)果，一是形態(tài)學(xué)特征，二是熒光的亮度。在免疫熒光工作中，尤其是這樣，必須將兩者結(jié)合起來(lái)綜合判斷，不可偏廢。結(jié)果記錄是根據(jù)主觀指標(biāo)或客觀指標(biāo)，但一般常是憑工作者目力觀察的主觀指標(biāo)由于這是定性的觀察，所以記錄的度較差。

隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，采用客觀指標(biāo)記錄結(jié)果已開始應(yīng)用。

①用不同厚度的中性濾片插入激發(fā)濾片和標(biāo)本之間的光路中，以看熒光減弱的極度；

②不同標(biāo)本以相同的曝光時(shí)間進(jìn)行顯微攝影，然后用光密度計(jì)測(cè)定膠卷圖象；

③直接用熒光計(jì)測(cè)熒光色素和兔疫熒光染色的鏡下標(biāo)本；

④用光敏電池曝光表測(cè)定圖象的亮度，或者與掃描裝置結(jié)合，對(duì)視場(chǎng)的特定部位進(jìn)行掃描等，如熒光顯微光度計(jì)。

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